Imunomodulatorni citokini u karotidnoj bolesti
Immunomodulatory cytokines in carotid disease
Докторанд
Stanković, MilošМентор
Ljujić, BiljanaЧланови комисије
Lukić, Miodrag L.Milošević, Bojan
Pejnović, Nada
Метаподаци
Приказ свих података о дисертацијиСажетак
Karotidna bolest je aterosklerotsko suženje karotidnih arterija, gde
inflamacija igra ključnu ulogu u patološkoj i kliničkoj progresiji razvoja
aterosklerotskih plakova. Uprkos toj činjenici, precizni molekulski i ćelijski
mehanizmi stvaranja karotidnog plaka i dalje nisu u potpunosti razjašnjeni.
U našem istraživanju ispitivali smo serumski nivo IL-10, kao i serumski
nivo i tkivnu ekspresiju IL-33 i ST2 receptora u aterosklerotskim plakovima kod
pacijenata podvrgnutih operativnom lečenju aterosklerotskog oboljenja karotidnih
arterija, karotidnoj endarterektromiji. U studiji su učestvovali pacijenti sa
aterosklerotskom stenozom karotidne arterije i zdrave osobe. Serumske
koncentracije IFN-γ, TNF-α, IL-6, IL-17, IL-1β, IL-23, IL-18, IL-10, IL-33 i ST2 su
određivane ELISA metodom. Takođe, preoperativno su mereni serumski nivoi IL-33 i
rastvorljivog ST2 (sST2). Izvršena je histološka klasifikacija aterosklerotskih
plakova dobijenih tokom operacije, kao i imunohistohemijska ana...liza ekspresije IL33, IL-33R, CD68 i alfa-SMA. Prikupljeni su demografski i klinički podaci o
pacijentima podvrgnutim operativnom lečenju- pol, starost, pušački status, krvni
pritisak, glikemija, nivo hemoglobina i kreatinina, prateći komorbiditeti, nakon
čega su poređenja među varijablama statistički analizirana.
Pacijenti podrvgnuti endarterektomiji su imali značajno više serumske
vrednosti IL-10 u poređenju sa zdravim kontrolama. Pacijenti sa stepenom stenoze
karotidne arterije manjim od 70% ili većim od 70% se nisu razlikovali u odnosu na
pol, starost, kardiovaskularne rizikofaktore izuzev hipertenzije, neurosimptoma i
AHA tipa plaka. Serumski nivo IL-10 se značajno razlikuje između bolesnika sa
različitim tipovima aterosklerotskog plaka. Pacijenti sa nekomplikovanim plakom
su imali značajno više vrednosti serumskog IL-10 u odnosu na pacijente sa
komplikovanim plakom, pa cirkulišući IL-10 može da diferencira bolesnike sa
komplikovanim plakovima od onih sa nekomplikovanim plakom. Serumski nivoi IL-33
i sST2 bili su značajno veći u grupi pacijenta podvrgnutih karotidnoj
endarterektomiji u poređenju sa zdravim ispitanicima. Pokazali smo obilnu tkivnu
ekspresiju IL-33 i ST2 u aterosklerotskim lezijama karotidne arterije. Nivoi
ekspresije IL-33 i IL-33R bili su značajno veći kod nestabilnih plakova i značajno
koreliraju sa stepenom infiltracije inflamacijskih ćelija u ovim plakovima.
Imunohistohemijskom analizom je takođe otkriveno da ćelije odgovorne za ekspresiju
IL-33 nisu samo mononuklearne ćelije ograničene na inflamacijske aterosklerotske
lezije, već i glatkomišićne ćelije koje su stekle fenotipske karakteristike penastih
ćelija i ispunile se lipidnim kapljicama. Dobijeni rezultati potvrđuju značaj IL33/ST2 osovine u procesu ateroskleroze i ukazuju na njenu dvosmislenu funkciju u
imunskom odgovoru, bilo kao proinflamacijski citokin u uznapredovalim
aterosklerotskim lezijama, ili kao profibrotičan, u ranim fazama lezija. Serumski
IL-10 može biti potencijalni biomarker za razlikovanje bolesnika sa karotidnom
bolešću od zdravih osoba. Niži nivoi IL-10 su povezani sa prisustvom
komplikovanih plakova.
Carotid atherosclerosis is manifested by atherosclerotic narrowing of the carotid arteries
where inflammation plays a key role in the progression of atherosclerotic plaques. Despite
this fact, the precise molecular and cellular mechanisms of carotid plaque formation are still
not fully elucidated. The role of IL-10 in carotid disease has not been fully investigated. In
our study, we examined serum IL-10 levels, as well as serum levels and tissue expression of
IL-33 and ST2 receptors in atherosclerotic plaques in patients undergoing carotid
endarterectomy. Patients with atherosclerotic carotid stenosis and healthy controls were
enrolled in this study. Serum IFN-γ, TNF-α, IL-6, IL-17, IL-1β, IL-23, IL-18, IL-10, IL-33
and ST2 levels were determined by ELISA. Also, serum levels of IL-33 and soluble ST2
(sST2) were measured preoperatively. Atherosclerotic plaques obtained during surgery were
initially histologically classified and immunohistochemical analyzes of IL-33, IL-33R, CD...68,
and alpha-SMA expression was performed. Demographic and clinical data such as gender,
age, smoking status, blood pressure, glycaemia, hemoglobin and creatinine levels and
comorbidities were collected and the comparisons between variables were statistically
evaluated. Patients undergoing endarterectomy had significantly higher circulating IL-10
levels in comparison with healthy controls and IL-10 has good discriminatory efficacy
between these two groups. Patients with < 70% and those with > 70% of carotid stenosis did
not differ in terms of age, sex, cardiovascular risk factors except hypertension,
neurosymptoms, and AHA plaque types. Circulating IL-10 levels differed significantly among
patients with different carotid plaque types. Patients with uncomplicated plaques had
significantly higher serum levels of IL-10 compared to those with complicated plaques.
Serum levels of IL-33 and sST2 were significantly higher in the group of patients undergoing
carotid endarterectomy compared to healthy subjects. We demonstrated abundant tissue
expression of IL-33 and ST2 in atherosclerotic carotid artery lesions. The levels of IL-33 and
IL-33R expression were significantly higher in vulnerable plaques and significantly correlated
with the degree of inflammatory cells infiltration in these plaques. Immunohistochemical
analysis also revealed that cells responsible for IL-33 expression are not only mononuclear
cells confined to inflammatory atherosclerotic lesions but also smooth muscle cells which
gained phenotypic characteristics of foam cells and were loaded with lipid droplets. The
obtained results confirm the importance of IL-33/ST2 axis in the process of atherosclerosis,
and indicate its ambiguous function in immune response, whether as proinflammatory
cytokine in advanced atherosclerotic lesions or as profibrotic, in early lesions. IL-10 might be
a potential biomarker in discriminating patients with carotid disease from healthy controls.
Decreased serum levels of IL-10 are related to complicated carotid plaques.