Show simple item record

Development of biological assays for identification of steroid receptor ligands and determination of activity of steroidogenic enyzme aromatase

dc.contributor.advisorJovanović–Šanta, S.
dc.contributor.advisorĆelić, Anđelka
dc.contributor.otherPetri, Edward
dc.contributor.otherJovanović–Šanta, S.
dc.contributor.otherĆelić, Anđelka
dc.contributor.otherNikolić, Andrea
dc.contributor.otherProdanović, Radivoje
dc.creatorBekić, Sofija
dc.date.accessioned2020-08-28T15:14:35Z
dc.date.available2020-08-28T15:14:35Z
dc.date.issued2020-08-07
dc.identifier.urihttps://www.cris.uns.ac.rs/DownloadFileServlet/Disertacija158927863211156.pdf?controlNumber=(BISIS)114417&fileName=158927863211156.pdf&id=15352&source=NaRDuS&language=srsr
dc.identifier.urihttps://www.cris.uns.ac.rs/record.jsf?recordId=114417&source=NaRDuS&language=srsr
dc.identifier.urihttps://www.cris.uns.ac.rs/DownloadFileServlet/IzvestajKomisije158927878572192.pdf?controlNumber=(BISIS)114417&fileName=158927878572192.pdf&id=15353&source=NaRDuS&language=srsr
dc.identifier.uri/DownloadFileServlet/IzvestajKomisije158927878572192.pdf?controlNumber=(BISIS)114417&fileName=158927878572192.pdf&id=15353
dc.identifier.urihttp://nardus.mpn.gov.rs/handle/123456789/17367
dc.description.abstractU ovoj doktorskoj disertaciji  razvijen  je fluorescentni test u kvascu za identifikaciju potencijalnih prirodnih ili sintetičkih liganada  ERα, ERβ ili AR i kvantifikaciju  njihovog  afiniteta  vezivanja sa mogućnošću testiranja čitavih biblioteka modifikovanih steroida i ksenoestrogena. Takođe, opisana  je primena optimizovanog biosenzora  za  procenu  estrogenog  potencijala sintetskih steroida i odabranih biljnih ekstrakata bogatih jedinjenjima fitoestrogenih osobina. U cilju potpunijeg sagledavanja mehanizma  delovanja  odabranih  modifikovanih  steroida  ispitana  je  njihova antiproliferativna aktivnost prema ćelijskim  linijama estrogen receptor pozitivnog kancera dojke  (MCF-7) i kancera prostate (PC-3), dok su  in silico metodom molekularnog  dokinga  predviđene  energije  i  geometrije  vezivanja  ovih  jedinjenja za ligand-vezujuće  domene  ERα i ERβ. Drugi deo ovog rada obuhvata razvoj testa za  ispitivanje aktivnosti humanog enzima aromataze,  heterologno eksprimiranog u ćelijama  kvasca  Saccharomyces cerevisiae  i/ili  bakterija Escherichia coli, u prisustvu  ili  odsustvu  inhibitora.  Interakcije modifikovanih  steroida, odabranih na osnovu strukture,  sa  aromatazom  ispitane  su  osetljivim spektroskopskim metodama, praćenjem promene spinskog stanja Fe iz hem grupe ili promene fluorescencije ostatka  triptofana  iz  aktivnog  centra usled konformacione  promene  proteina, izazvane interakcijom sa ligandom. Razvijeni in vitro testovi bez upotrebe radioaktivnih izotopa su, osim  visoke efikasnosti  i  bezbednosti  po  korisnika  i  okolinu, pokazali  specifičnost  i  ekonomičnost  u preliminarnom  skriningu  liganada  steroidnih receptora  i inhibitora aromataze. Jedinjenja  kod kojih je detektovana  značajna biološka aktivnost mogu potencijalno poslužiti kao osnova za razvoj terapeutika u lečenju hormon-zavisnih bolesti i stanja, koja danas predstavljaju globalni zdravstveni problem.sr
dc.description.abstractIn  this  doctoral  dissertation,  a  fluorescent  assay  in  yeast  was  developed  for  identification  of  potential  natural or synthetic ligands of ERα, ERβ or AR and quantification  of  their  binding  affinity,  as  well  asevaluation  of  the  estrogenic  potential  of  synthetic steroids  and  selected  plant  extracts  rich  in phytoestrogen  content.  The  assay  could  be  used  to  screen  libraries  of  modified  steroids  and xenoestrogens.  In  order  to  better  understand  the biomedical  potential  of  selected  modified  steroids, results  were  compared  to  antiproliferative  activity against  estrogen  receptor  positive  breast  cancer (MCF-7)  and  prostate  cancer  (PC-3)  cell  lines. Binding  energies  and  the  geometry  of  binding  of these  compounds  for  ERα  and  ERβ  ligand  binding domains  were  predicted  in  silico  by  molecular  docking  methods.  The  second  part  of  this  study includes development  of  an  assay  for  study  of  aromatase  activity  in  the  presence  or  absence  of inhibitors  by  heterologous  expression  of  human aromatase  in  Saccharomyces  cerevisiae  and/or Escherichia  coli  cells,  as  model-organisms. Furthermore, interactions between modified steroids, selected  according  to  their  structure,  and  aromatase were  tested  using  sensitive  spectroscopic  methods based on ligand-induced changes  in  the  spin state of Fe  from  the  heme  group  or  changes  in  the fluorescence  of  a  tryptophan  residue  in  the  active site.  The  non-radioactive  in  vitro  assays  developed  here, besides high efficiency, user and environmental safety,  also  have  greater  specificity  and  are  more cost-effective  for  preliminary  screening  of  steroid receptor  ligands  and  aromatase  inhibitors. Additionally,  compounds  identified  to  express significant biological activity can serve as a basis for the  development  of  potential  therapeutics  in  the treatment  of  hormone-dependent  diseases  and conditions, a global health issue today.en
dc.languagesr (latin script)
dc.publisherУниверзитет у Новом Саду, Природно-математички факултетsr
dc.relationinfo:eu-repo/grantAgreement/MESTD/Basic Research (BR or ON)/172021/RS//
dc.rightsAttribution-NonCommercial-NoDerivs
dc.sourceУниверзитет у Новом Садуsr
dc.subjectSteroidni receptorisr
dc.subjectSteroid receptorsen
dc.subjectERαen
dc.subjectERβen
dc.subjectARen
dc.subjectmodified steroidsen
dc.subjecthormone-dependent cancersen
dc.subjectphytoestrogensen
dc.subjectbiomedical potentialen
dc.subjectfluorescent assayen
dc.subjectliganden
dc.subjectbinding affinityen
dc.subjectaromataseen
dc.subjectaromatase inhibitorsen
dc.subjectsteroidogenesisen
dc.subjectERαsr
dc.subjectERβsr
dc.subjectARsr
dc.subjectmodifikovani steroidisr
dc.subjecthormonski zavisni kancerisr
dc.subjectfitoestrogenisr
dc.subjectbiomedicinski potencijalsr
dc.subjectfluorescentni testsr
dc.subjectligandsr
dc.subjectafinitet vezivanjasr
dc.subjectaromatazasr
dc.subjectinhibitori aromatazesr
dc.subjectsteroidogenezasr
dc.titleRazvoj bioloških testova za identifikaciju liganada steroidnih receptora i ispitivanje aktivnosti steroidogenog enzima aromatazesr
dc.title.alternativeDevelopment of biological assays for identification of steroid receptor ligands and determination of activity of steroidogenic enyzme aromataseen
dc.typeDoktorska disertacijasr
dc.identifier.fulltexthttp://nardus.mpn.gov.rs/bitstream/id/65018/IzvestajKomisije.pdf
dc.identifier.fulltexthttp://nardus.mpn.gov.rs/bitstream/id/65017/Disertacija.pdf


Files in this item

Thumbnail
Thumbnail

This item appears in the following Collection(s)

Show simple item record