Terapeutski potencijal anti-tetanus toksoid monoklonskih antitela: primena zasnovana na vezivnim karakteristikama
Therapeutic potential of anti-tetanus toxoid monoclonal antibodies: application based on binding properties
Докторанд
Lukić, Ivana D.Ментор
Stojanović, MarijanaЧланови комисије
Gavrović-Jankulović, MarijaProdanović, Radivoje
Stojanović, Marijana
Gavrović-Jankulović, Marija
Метаподаци
Приказ свих података о дисертацијиСажетак
Tetanus toksin (TT), produkt anaerobne bakterije Clostridium tetani, je izuzetno
potentan neurotoksin koji može izazvati tetanus, teško i često fatalno oboljenje. Uprkos
višedecenijskom sistematskom sprovođenju vakcinacije protiv tetanusa, incidenca
tetanusa još uvek nije zanemarljiva. TT-specifična antitela su ključni faktor u
sprečavanju intoksikacije TT-om. Pored toga, predpostavlja se da bi ova antitela, usled
ukrštene reaktivnosti, mogla doprinositi i otpornosti ka heterologim infekcijama. Kod
osoba koja nemaju uspostavljen adekvatan TT-specifičan imunski odgovor, a postoji
sumnja na intoksikaciju TT-om, preporučuje se imunoterapija koja podrazumeva
aplikaciju TT-specifičnih antitela sposobnih da neutrališu slobodno cirkulišući TT. Duži
niz godina se kao imunoterapeutici razmatraju i TT-specifična monoklonska antitela
(MAt) gde se kao jedan od problema nameće pitanje kako selektovati zaštitno MAt i / ili
formulisati efikasan preparat s obzirom da specifičnost ka TT ne znači nužno ...i zaštini
potencijal.
Cilj ove doktorske disertacije je da se, kroz ispitivanje vezivnih karakteristika
panela TTd/TT-specifičnih MAt i njihovog zaštitnog potencijala in vivo, utvrdi na koji
način i u kojoj meri vezivne karakteristike TTd/TT specifičnih antitela određuju njihovu
sposobnost da spreče intoksikaciju TT-om i / ili doprinesu otpornosti ka heterologim
infekcijama.
Istraživanja realizovana u okviru izrade ove doktorske teze su pokazala da se
zaštitni potencijal anti-TTd / TT antitela može proceniti na osnovu afiniteta ka TT-u i
sposobnosti da inhibiraju TT-GD1b interakciju. TT-specifična antitela koja mogu da
spreče in vivo intoksikaciju TT-om treba da vezuju TT-om sa afinitetom ≥ 1x108 M-1 i
da istovremeno imaju sposobnost da inhibiraju vezivanje TT-a za GD1b gangliozide.
Afinitet prema TT-u je prvi selekcioni kriterijum zaštitnih TT-specifičnih antitela, a
potom njihova sposobnost da preveniraju TT-GD1b interakciju. Zaštitni potencijal TTspecifičnih
antitala čiji je afinitet ka TT-u ≥ 1x108 M-1 dominantno određuje sposobnost
inhibiranja TT-GD1b interakcije a ne sam afinitet...
is an extremely potent neurotoxin that can cause tetanus, a severe and often fatal
disease. Mandatory vaccination against tetanus is introduced worldwide and it was
crucial for a significant decline of tetanus cases. Nevertheless, the prevalence of the
disease is not negligible, particularly in the developing world. Antibodies capable to
neutralize TT are key factors in protection against tetanus disease. It is assumed that
antibodies may, due to cross-reactivity, contribute to the immunity against heterologous
pathogens. TT intoxications can be efficiently treated with various polyclonal antibodybased
therapies. Although antibody-based therapeutics for treatment of tetanus exist on
the market its production is tedious. Monoclonal antibodies (MAbs) are considered for a
long time as a reagent of choice, but the core drawback is how to select a MAb and how
to prepare oligoclonal MAbs-based preparation that would be safe in providing
efficacious protection, since available data clearly de...monstrate that the ability of a
single MAb to bind TT does not necessarily mean that this MAb protects from tetanus
intoxication.
The aims of this thesis were to evaluate the binding characteristics and
protective capacity of TTd/TT-specific MAb(s)-based preparations, to determine how
these binding characteristics correlate with the observed in vivo effects and to
investigate whether these preparations could contribute to the development of
heterologous immunity.
In this PhD thesis, we showed that the selection of protective anti-TTd/TT MAbs
can be performed by the in vitro testing combining two assays: (i) the measurement of
MAb affinity toward TT (ii) the evaluation of its capability to prevent TT-ganglioside
interaction. TT-specific antibodies that prevent in vivo TT intoxication bind TT with
affinity ≥ 1x108 M-1 and, at the same time, possess the ability to inhibit binding of TT to
GD1b ganglioside. MAb’s afinity toward TT is the first selection criterion of protective
TT-specific antibodies, and the second criterion is their ability to prevent TT-GD1b
interaction...
Факултет:
Универзитет у Београду, Хемијски факултетДатум одбране:
21-09-2018Пројекти:
- Алергени, антитела, ензими и мали физиолошки значајни молекули: дизајн, структура, функција и значај (RS-172049)