Antioksidativno, antimikrobno i alelopatsko dejstvo tri endemične vrste roda Nepeta (Lamiaceae)

Abstract

Nepeta rtanjensis Diklić i Milojević, N. sibirica L. i N. nervosa Royle ex Bentham (fam. Lamiaceae) su endemične vrste roda Nepeta, koje su nedovoljno fitohemijski okarakterisane i slabo ispitane u pogledu biološke aktivnosti. Radi se o vrstama koje se odlikuju različitim kvalitativnim i kvantitativnim sadržajem nepetalaktona, zbog čega predstavljaju idealne objekte u istraživanjima biološke aktivnosti različitih izomera ovog monoterpenskog jedinjenja. S obzirom da se radi o retkim vrstama, a u slučaju N. rtanjensis i o krajnje ugroženoj vrsti, biljni materijal za potrebe eksperimenata je dobijen mikropropagacijom. Istraživanje je obuhvatilo fitohemijske analize sekundarnih metabolita tri vrste roda Nepeta gajenih in vitro, kao i analizu njihovih bioaktivnih svojstava kao što su antimikrobno, antioksidativno i alelopatsko dejstvo. Fitohemijska karakterizacija tri vrste roda Nepeta gajenih in vitro, omogućila je identifikaciju i kvantifikaciju glavnih grupa sekundarnih metabolita (terpenoida i fenolnih jedinjenja) koji se u ovim uslovima produkuju. Metode koje su korišćene u fitohemijskim analizama su: GC-MS, GC-FID, PTR-MS, Headspace GC-MS, HPLCUV, HPLC-MS, UHPLC/DAD/±HESI-MS/MS. Dominantno isparljivo jedinjenje iz grupe terpenoida je monoterpenski lakton - nepetalakton, pri čemu je kod vrste N. rtanjensis većinski prisutan tran,cis- izomer a kod N. sibirica cis,trans- izomer nepetalaktona. Kod vrste N. nervosa nepetalakton je detektovan samo u tragovima. Kod ispitivanih vrsta, ruzmarinska kiselina se javlja kao dominantno fenolno jedinjenje, dok su ostale fenolne kiseline (hlorogena, neohlorogena i kafeinska kiselina) prisutne u znatno nižoj koncentraciji. Metanolni ekstrakti N. rtanjensis, N. sibirica i naročito N. nervosa, pokazuju značajnu antioksidativnu aktivnost u ABTS i DPPH testovima, kao i visoki kapacitet za redukciju gvožđa u FRAP testu. Značajna antioksidativna aktivnost se pripisuje fenolnim jedinjenjima, na prvom mestu ruzmarinskoj kiselini...

Nepeta rtanjnsis Diklić and Milojević, N. sibirica L. and N. nervosa Royle ex Bentham (fam. Lamiaceae) are endemic species of genus Nepeta that are insufficiently phytochemically characterized and poorly tested in a sense of their biological activity. These three species are characterized by different qualitative and quantitative nepetalactone content, what makes them ideal objects in investigating the biological activity of different stereoisomers of this compound. Considering that these species are rare, and extremely endangered in case of N. rtanjensis, plant material for the experiments was obtained by micropropagation. The research included phytochemical characterization of in vitro grown three Nepeta species , as well as analysis of their bioactivities such as antimicrobial, antioxidative activity and allelopathic potential. Phytochemical characterization of three Nepeta species grown in vitro, involving GC-MS, GC-FID, PTR-MS, Headspace GC-MS, HPLC-UV, HPLC-MS, and UHPLC/DAD/±HESI-MS/MS analyses, enabled identification and quantification of the main secondary metabolites (terpenes and phenolics). The dominant volatile compound from terpenes group is monoterpene lacton - nepetalactone, whereby its trans,cisisomer is mostly present in N. rtanjensis and its cis,trans- isomer in N. sibirica. In N. nervosa, nepetalactone has been detected only in traces. In all investigated species, rosmarinic acid is a dominant phenolic compound, while the other phenolic acids (chlorogenic, neochlorogenic and caffeic acids) are present in significantly lower concentrations. The results of ABTS and DPPH assays showed that methanol extracts of N. rtanjensis, N. sibirica and especially N. nervosa, possess considerable antioxidant activities, and the FRAP assay revealed high ferric reducing capacity for all the samples tested.. Significant antioxidant activity is attributed to phenolic acids, in the first place to rosmarinic acid.