Приказ основних података о дисертацији

In vitro efekat nematofagne gljive Duddingtonia flagrans naželudačno-crevne strongilide ovaca

dc.contributor.advisorLalošević, Vesna
dc.contributor.otherPavlović, Ivan
dc.contributor.otherĐurić, Simonida
dc.creatorSimin, Stanislav
dc.date.accessioned2020-02-26T16:23:19Z
dc.date.available2020-02-26T16:23:19Z
dc.date.available2020-07-03T13:33:12Z
dc.date.issued2016-12-28
dc.identifier.urihttps://nardus.mpn.gov.rs/handle/123456789/12034
dc.identifier.urihttps://www.cris.uns.ac.rs/DownloadFileServlet/Disertacija147523730117193.pdf?controlNumber=(BISIS)101881&fileName=147523730117193.pdf&id=6943&source=NaRDuS&language=srsr
dc.identifier.urihttps://www.cris.uns.ac.rs/record.jsf?recordId=101881&source=NaRDuS&language=srsr
dc.identifier.urihttps://www.cris.uns.ac.rs/DownloadFileServlet/IzvestajKomisije147523738201513.pdf?controlNumber=(BISIS)101881&fileName=147523738201513.pdf&id=6944&source=NaRDuS&language=srsr
dc.description.abstractЖелудачно-цревне стонгилиде представљају један од најважнијих фактора који негативно утичу на здравље, добробит и економичност производње свих категорија оваца које се узгајају на пашњацима. Контрола паразитског гастроентеритиса (ПГЕ) се најчешће спроводи применом антихелминтика. Међутим, интензивна примена је довела до развоја резистенције код свих класа лекова, и представља значајан проблем на глобалном нивоу. Примена нематофагних гљива у редукцији броја ларвица на пашњаку, посебно врсте Duddingtonia flagrans, је једна од мера у оквиру интегрисане контроле паразита оваца. Гљива се даје овцама без обзира на ниво паразитизма, а ефекат је дозно-завистан. Према недавним подацима из литературе, редукција се чак смањује када однос између броја хламидоспора и јаја паразита (ХПГ:ЈПГ) у измету није оптималан. Циљ истраживања је утврђивање врста желудачно-цревних стонгилида и њиховог значаја на једној фарми оваца; провера ефикасности ивермектина који се најчешће користи у контроли ПГЕ на имању и провера хипотезе да се најбољи ефекат гљиве in vitro постиже формирањем доза заснованом на оптималном односу ХПГ:ЈПГ. Овце су клинички прегледане да се утврде симптоми ПГЕ. Паразитолошка испитивања и идентификација стронгилида су урађени стандардним копролошким техникама и прегледом одраслих облика из органа дигестивног тракта. Интензитет инвазије је процењен на основу налаза броја јаја и резултата копрокултуре. Способност FAMACHA© дијаграма да дијагностикује клиничку анемију је упоређена утврђивањем корелације са вредностима хематокрита. Ефикасност ивермектина против стронгилида и рода Nematodirus је испитана посебно, применом стандардног теста редукције јаја (FECRT). Нематофагна активност изолата D. flagrans MUCL 9827 је испитивана кроз интеракцију инфективних ларвица стронгилида са културом засејаном на 2% гладни агар. Утврђивање ХПГ:ЈПГ односа у којем D. flagrans MUCL 9827 доводи до оптималне редукције ларвица је урађено помоћу теста копрокултуре за дванаест природно заражених оваца, при чему је свака животиња посебна експериментална јединица. Испитане су четири дозе хламидоспора (0:1 (контрола); 2:1; 5:1; 10:1; 20:1), а за сваку дозу (однос) је урађено по 3 понављања. Код оваца на испитиваном имању паразитира 11 врста желудачно-цревних стронгилида: - у сиришту: Haemonchus contortus, Teladorsagia circumcinta и Trichostrongylus axei; - у танком цреву: Trichostrongylus colubriformis, Nematodirus spathiger, Nematodirus filicollis, Nematodirus abnormalis и Strongyloides papillosus; - у дебелом цреву: Chabertia ovina, Oesophagostomum venulosum и Trichuris discolor Доминантна врста током целе године је H. contortus, у просеку чини 72,3% популације а највиши ниво достиже у летњим месецима. Род Trichostrongylus је други по значају уз заступљеност од 17,6% и преовлађује у јесењим месецима. Клинички симптоми и патоанатомски налаз одговарају ПГЕ (Trichostrongylidosis et strongylosis ventriculi et intestini ovium). Интензитет инвазије је висок односно умерен за 31,7% и 28,4% прегледаних животиња, тим редом, што значи да је потребно је применити дехелминтизацију у 60,1% инвадираних оваца. Помоћу FAMACHA© дијаграма нису успешно идентификоване овце које су имале клиничку анемију због негативне корелације са вредностима хематокрита (rho=- 0,2446, р=0,0541). Након теста редукције јаја (FECRT), установљено је да ефикасност ивермектина стронгилида износи око 80% (у распону од 67-99%). У односу на генеричку ефикасност, најмање је осетљив род Trichostrongylus (ПР(%)=33-80), резистенција коју додатно треба испитати постоји код T. circumcinta (ПР(%)=93; 95% ИП: 83-97), а сумња на резистенцију је установљена код H. contortus (ПР(%)=97; 95% ИП: 89-99). Резистенција постоји и код рода Nematodirus, где је редукција јаја била 74% (95% ИП: 38-89). У in vitro условима, D. flagrans MUCL 9827 развија замке и хвата инфективне ларвица, што је утврђено на 2% гладном агару, али само у једној култури. D. flagrans MUCL 9827 је у тесту копрокултуре постигла дозно-зависну редукцију ларвица желудачно-цревних стронгилида оваца у распону од 11,31-29,02%, али та редукција није била значајна у односу на контролу (р=0,827). Проценат смањења броја ларвица за ХПГ:ЈПГ однос 10:1 је био 4% мањи у односу на ХПГ:ЈПГ однос 20:1, а забележена је и боља активност против ИВМ резистентних ларвица и најмањи број култура без икакве редукције. Забележени клинички симптоми, употпуњени копролошким, патоанатомским и налазом интензитета инвазије потврђују да ПГЕ има значајан утицај на здравље, добробит и производне параметре оваца. Терапија ивермектином није довољно ефикасна у контроли стронгилида оваца на имању због присуства резистенције. Испитивани изолат гљиве испољава биолошки ефекат in vitro. Одређено је да је у датим условима теста копрокултуре оптимални ХПГ:ЈПГ однос 10:1. На основу резултата у in vitro условима, изолат D. flagrans MUCL 9827 није погодан за биолошку контролу желудачно-цревних стронгилида оваца.sr
dc.description.abstractŽeludačno-crevne stongilide predstavljaju jedan od najvažnijih faktora koji negativno utiču na zdravlje, dobrobit i ekonomičnost proizvodnje svih kategorija ovaca koje se uzgajaju na pašnjacima. Kontrola parazitskog gastroenteritisa (PGE) se najčešće sprovodi primenom antihelmintika. Međutim, intenzivna primena je dovela do razvoja rezistencije kod svih klasa lekova, i predstavlja značajan problem na globalnom nivou. Primena nematofagnih gljiva u redukciji broja larvica na pašnjaku, posebno vrste Duddingtonia flagrans, je jedna od mera u okviru integrisane kontrole parazita ovaca. Gljiva se daje ovcama bez obzira na nivo parazitizma, a efekat je dozno-zavistan. Prema nedavnim podacima iz literature, redukcija se čak smanjuje kada odnos između broja hlamidospora i jaja parazita (HPG:JPG) u izmetu nije optimalan. Cilj istraživanja je utvrđivanje vrsta želudačno-crevnih stongilida i njihovog značaja na jednoj farmi ovaca; provera efikasnosti ivermektina koji se najčešće koristi u kontroli PGE na imanju i provera hipoteze da se najbolji efekat gljive in vitro postiže formiranjem doza zasnovanom na optimalnom odnosu HPG:JPG. Ovce su klinički pregledane da se utvrde simptomi PGE. Parazitološka ispitivanja i identifikacija strongilida su urađeni standardnim koprološkim tehnikama i pregledom odraslih oblika iz organa digestivnog trakta. Intenzitet invazije je procenjen na osnovu nalaza broja jaja i rezultata koprokulture. Sposobnost FAMACHA© dijagrama da dijagnostikuje kliničku anemiju je upoređena utvrđivanjem korelacije sa vrednostima hematokrita. Efikasnost ivermektina protiv strongilida i roda Nematodirus je ispitana posebno, primenom standardnog testa redukcije jaja (FECRT). Nematofagna aktivnost izolata D. flagrans MUCL 9827 je ispitivana kroz interakciju infektivnih larvica strongilida sa kulturom zasejanom na 2% gladni agar. Utvrđivanje HPG:JPG odnosa u kojem D. flagrans MUCL 9827 dovodi do optimalne redukcije larvica je urađeno pomoću testa koprokulture za dvanaest prirodno zaraženih ovaca, pri čemu je svaka životinja posebna eksperimentalna jedinica. Ispitane su četiri doze hlamidospora (0:1 (kontrola); 2:1; 5:1; 10:1; 20:1), a za svaku dozu (odnos) je urađeno po 3 ponavljanja. Kod ovaca na ispitivanom imanju parazitira 11 vrsta želudačno-crevnih strongilida: - u sirištu: Haemonchus contortus, Teladorsagia circumcinta i Trichostrongylus axei; - u tankom crevu: Trichostrongylus colubriformis, Nematodirus spathiger, Nematodirus filicollis, Nematodirus abnormalis i Strongyloides papillosus; - u debelom crevu: Chabertia ovina, Oesophagostomum venulosum i Trichuris discolor Dominantna vrsta tokom cele godine je H. contortus, u proseku čini 72,3% populacije a najviši nivo dostiže u letnjim mesecima. Rod Trichostrongylus je drugi po značaju uz zastupljenost od 17,6% i preovlađuje u jesenjim mesecima. Klinički simptomi i patoanatomski nalaz odgovaraju PGE (Trichostrongylidosis et strongylosis ventriculi et intestini ovium). Intenzitet invazije je visok odnosno umeren za 31,7% i 28,4% pregledanih životinja, tim redom, što znači da je potrebno je primeniti dehelmintizaciju u 60,1% invadiranih ovaca. Pomoću FAMACHA© dijagrama nisu uspešno identifikovane ovce koje su imale kliničku anemiju zbog negativne korelacije sa vrednostima hematokrita (rho=- 0,2446, r=0,0541). Nakon testa redukcije jaja (FECRT), ustanovljeno je da efikasnost ivermektina strongilida iznosi oko 80% (u rasponu od 67-99%). U odnosu na generičku efikasnost, najmanje je osetljiv rod Trichostrongylus (PR(%)=33-80), rezistencija koju dodatno treba ispitati postoji kod T. circumcinta (PR(%)=93; 95% IP: 83-97), a sumnja na rezistenciju je ustanovljena kod H. contortus (PR(%)=97; 95% IP: 89-99). Rezistencija postoji i kod roda Nematodirus, gde je redukcija jaja bila 74% (95% IP: 38-89). U in vitro uslovima, D. flagrans MUCL 9827 razvija zamke i hvata infektivne larvica, što je utvrđeno na 2% gladnom agaru, ali samo u jednoj kulturi. D. flagrans MUCL 9827 je u testu koprokulture postigla dozno-zavisnu redukciju larvica želudačno-crevnih strongilida ovaca u rasponu od 11,31-29,02%, ali ta redukcija nije bila značajna u odnosu na kontrolu (r=0,827). Procenat smanjenja broja larvica za HPG:JPG odnos 10:1 je bio 4% manji u odnosu na HPG:JPG odnos 20:1, a zabeležena je i bolja aktivnost protiv IVM rezistentnih larvica i najmanji broj kultura bez ikakve redukcije. Zabeleženi klinički simptomi, upotpunjeni koprološkim, patoanatomskim i nalazom intenziteta invazije potvrđuju da PGE ima značajan uticaj na zdravlje, dobrobit i proizvodne parametre ovaca. Terapija ivermektinom nije dovoljno efikasna u kontroli strongilida ovaca na imanju zbog prisustva rezistencije. Ispitivani izolat gljive ispoljava biološki efekat in vitro. Određeno je da je u datim uslovima testa koprokulture optimalni HPG:JPG odnos 10:1. Na osnovu rezultata u in vitro uslovima, izolat D. flagrans MUCL 9827 nije pogodan za biološku kontrolu želudačno-crevnih strongilida ovaca.sr
dc.description.abstractGastrointestinal strongyles represent one of the main factors which have negative impact on health, welfare and economics of production of all grazing sheep categories. The usual control measures of parasitic gastroenteritis (PGE) involve the use of anthelmintics. However, intensive exploitation of this approach has led to the development of resistance in all classes of drugs, which represents a significant problem globally. Reduction in larval numbers on the pastures using nematophagous fungi, particularly Duddingtonia flagrans, represents one of the promising measures of the integrated sheep parasite control. The fungus is administered to sheep regardless of parasite burden and the effect is dose-dependent. According to the recent literature data, reduction could even be decreased if the ratio between the number of chlamydospores and parasite eggs (CPG:EPG) in the feces is not optimal. The aim of this research was identification of the gastrointestinal strongyle species, and investigation of their impact on a particular sheep farm; determination of the efficacy of ivermectin which was the most frequently used drug for the control of PGE on the property and to check the hypothesis that the best effect of fungal treatment in vivo is achieved if dosage is based on the optimal CPG:EPG ratio. Sheep were clinically examined for the symptoms of PGE. Parasitological investigation and identification of strongyles were performed combining the standard coprological techniques and examination of the adult worms, collected from the gastrointestinal system of sheep. Evaluation of the intensity of the parasitic invasion was performed by combining the faecal egg counts and the results of coprocultures. Ability of FAMACHA© diagrams to diagnose clinical anemia was determined based on the correlation with the haematocrit values. The efficacy of ivermectin against strongyles and Nematodirus spp. was examined separately, using standard faecal egg count reduction test (FECRT). Nematophagous activity of D. flagrans isolate MUCL 9827 was examined through interaction of infective strongyle larvae with fungal culture grown on 2% water agar (WA). To determine CPG:EPG ratio at which larval reduction by D. flagrans MUCL 9827 is optimal, the coproculture assay was performed for 12 naturally infected sheep. Each animal was separate experimental unit. Four doses of chlamydospores were tested (0:1 (control); 2:1; 5:1; 10:1; 20:1), each at three repetitions. Eleven species of gastro-intestinal strongyles were found to parasitise sheep on the farm: - in the abomasum: Haemonchus contortus, Teladorsagia circumcinta and Trichostrongylus axei; - in the small intestine: Trichostrongylus colubriformis, Nematodirus spathiger, Nematodirus filicollis, Nematodirus abnormalis and Strongyloides papillosus; - in the large intestine: Chabertia ovina, Oesophagostomum venulosum and Trichuris discolor. The dominant species throughout the year was H. contortus, with 72.3% of average population which reaches the highest level in the summer months. Trichostrongylus is the second most important genus, comprising 17,6% of parasite population and reaching maximum levels during the autumn. Clinical symptoms and post-mortem findings corresponded to PGE (Trichostrongylidosis et strongylosis ventriculi et intestini ovium). Intensity of the invasion was high and medium in 31,7% and 28,4% of the examined animals, respectively, which means that 60,1% of sheep need anthelmintic treatement. Identification of sheep with clinical anemia using the FAMACHA© diagram was unsuccessful due to negative correlation with the haematocrit levels (rho=-0,2446, р=0,0541). According to FECRT, the efficacy of ivermectin against the strongyles was approximately 80% (with the range of 67-99%). Genus based efficacy calculations showed that the least sensitive was Trichostrongylus spp. (PR (%) = 33- 80), resistance which requires further examination was found in T. circumcinta (PR (%) = 93; 95% CIs: 83-97) and that resistance was suspected in H. contortus (PR (%) = 97; 95% CIs: 89- 99). Resistance was also observed in Nematodirus spp. with egg reduction level of 74% (95% CIs: 38-89)). D. flagrans MUCL 9827 showed trap development and subsequent trapping of infective larvae at tested in vitro conditions on 2% WA, but only in one plate. Dose dependent larval reduction in range of 11,31-29,02% was recorded after coproculture assay with D. flagrans MUCL 9827. However, this reduction was not considered significant, compared to the control (р=0,827). The percenage of larval reduction was 4% lower for 10:1 CPG:EPG ratio compared to 20:1 CPG:EPG ratio. Better activity against ivermectin-resistant larvae and the smallest number of cultures without any reduction was also observed for 10:1 ratio. The recorded clinical symptoms, with coprological, post-mortem and infection level findings, confirm that the PGE has a significant impact on the health, welfare and production parameters of sheep. Due to resistance, ivermectin therapy is not effective enough in sheep strongyle control on the examined farm. The tested isolate of D. flagrans exhibits biological effect, in vitro. It was determined that, in the given circumstances of the coproculture assay, the optimal CPG:EPG ratio is 10:1. Based on the results of the in vitro study, isolate D. flagrans MUCL 9827 is not considered suitable for biological control of gastrointestinal strongyles of the sheep.en
dc.languagesr (cyrillic script)
dc.publisherУниверзитет у Новом Саду, Пољопривредни факултетsr
dc.relationinfo:eu-repo/grantAgreement/MESTD/Technological Development (TD or TR)/31027/RS//
dc.rightsopenAccessen
dc.rights.urihttps://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/
dc.sourceУниверзитет у Новом Садуsr
dc.subjectовцеsr
dc.subjectovcesr
dc.subjectSheepen
dc.subjectželudačno-crevne strongilidesr
dc.subjectivermektinsr
dc.subjectrezistencijasr
dc.subjectDuddingtonia flagranssr
dc.subjectMUCL 9827sr
dc.subjectredukcijalarvicasr
dc.subjecttest koprokulture.sr
dc.subjectgastro-intestinal strongylesen
dc.subjectivermectinen
dc.subjectresistanceen
dc.subjectDuddingtonia flagransen
dc.subjectMUCL 9827en
dc.subjectlarval reductionen
dc.subjectcoproculture assayen
dc.subjectжелудачно-цревне стронгилидеsr
dc.subjectивермектинsr
dc.subjectрезистенцијаsr
dc.subjectDuddingtonia flagranssr
dc.subjectMUCL 9827sr
dc.subjectредукцијаларвицаsr
dc.subjectтест копрокултуре.sr
dc.titleIn vitro ефекат нематофагне гљиве Duddingtonia flagrans нажелудачно-цревне стронгилиде овацаsr
dc.title.alternativeIn vitro efekat nematofagne gljive Duddingtonia flagrans naželudačno-crevne strongilide ovacasr
dc.title.alternativeIn vitro effect of nematophagous fungus Duddingtoniaflagrans on gastro-intestinal strongyles of sheepen
dc.typedoctoralThesisen
dc.rights.licenseBY-NC-ND
dc.identifier.fulltexthttp://nardus.mpn.gov.rs/bitstream/id/36090/IzvestajKomisije.pdf
dc.identifier.fulltexthttps://nardus.mpn.gov.rs/bitstream/id/36089/Disertacija.pdf
dc.identifier.fulltexthttps://nardus.mpn.gov.rs/bitstream/id/36090/IzvestajKomisije.pdf
dc.identifier.fulltexthttp://nardus.mpn.gov.rs/bitstream/id/36089/Disertacija.pdf
dc.identifier.rcubhttps://hdl.handle.net/21.15107/rcub_nardus_12034


Документи за докторску дисертацију

Thumbnail
Thumbnail

Ова дисертација се појављује у следећим колекцијама

Приказ основних података о дисертацији